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微生物菌種保存方法之載體保存法即將微生物吸附在適當載體上進行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下幾種，如：①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏。方法是在滅菌的土壤中加入菌液，立即在室溫下進行干燥或使菌體繁殖后再干燥，然后冷藏或在室溫下密封保存。保存用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜，土壤需風干、粉碎、過篩和滅菌。使微生物在土壤中繁殖后進行干燥保存的方法是：取適量土壤(5克)，置于塞有棉塞的試管中，加水或加入充分稀釋的液體培養基(以含水量為土壤大持水量的60%為...

細胞復蘇凍存注意事項凍存和復蘇的原則：慢凍快融當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序1.標準程序：采用細胞凍存器當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2....

菌種保存有哪些注意事項從事菌種工作方面的朋友們一定知道，關于菌種的保藏是一件十分復雜的事情。那么究竟如何獲得的菌種保存效果呢?主要注意的有三個方面。*就是菌種在保存之前的狀態。絕大多數的菌種，保存的都應該十它的休眠體，比如說孢子或者是芽孢。而且用來保存的孢子或者是芽孢，應該采用的是新鮮的斜面上生長的非常豐滿的培養物。而菌種培養的時間和溫度都會影響到菌種的保存質量。如果說培養時間太短，那么保存的時候就容易死亡。而培養的時間如果太長，又容易使菌種的生產性能發生衰退。一般來說，溫度...

人前列腺癌細胞；LNCaP特征特性該細胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長，所以傳代的時候要反復吹打形成單個細胞；該細胞貼壁不牢，達不到匯合狀態，而且會使培養基迅速變酸；傳代后48h內一定要保持培養瓶靜止.如果此時挪動培養瓶，會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現此種情況，需要重新孵育24...

結腸癌細胞是一種成團、貼壁生長的細胞,如果狀態好的情況下,生長非常快，細胞形態是不太規則的三角形.在低濃度時，此細胞長梭型（不好描述），高濃度時長成一張地毯，后者才是狀態的。結腸癌細胞培養操作步驟：1．結腸癌細胞細胞用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；3．在距離紫外燈直射范圍內20-30厘米處照射2-3小時；4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培...

細胞培養常用培養基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養，是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱zui低必需培養基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，...

消毒滅菌對細胞株培養的重要性細胞株嚴格的消毒滅菌對保證細胞培養的成功是極為重要的，其方法分為物理法和化學法兩類。前者包括干熱、濕熱、濾過、紫外線及射線等，后者主要指使用化學消毒劑等。①熱滅菌：玻璃器皿，160~170℃，90~120min或180℃45~60min。②蒸氣滅菌：用于玻璃器皿、濾器橡膠塞、解剖用具、耐熱塑料器具、受熱不變性的溶液等，不同物品其有效滅菌壓力和時間不同，如培養用液、橡膠制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高壓滅菌10min;布類、玻璃制品、金屬器...

菌種是主要的生物資源，也是食用菌生產首要的生產資料。一個優良的菌種被選育出來以后，必須保持其優良性狀不變或盡可能地少變慢變，才不至于降低生產性能，能長期在生產中使用。因此，菌種保藏在食用菌生產上具有重要的意義。各種微生物由于遺傳特性不同，因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏方法，首先應能保持原菌種的優良性狀長期不變，同時還須考慮方法的通用性、操作的簡便性和設備的普及性。下面介紹幾種常用的菌種保藏方法：（一）斜面低溫保藏法將菌種接種在適宜的斜面培養基上，待菌種生長...